微生物法測(cè)定食品中的維生素B12、葉酸是國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)中的方法。因其檢出限低、靈敏度高、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，受到了國(guó)內(nèi)的廣泛青睞。在該方法中要用到三種培養(yǎng)基：貯存菌用培養(yǎng)基、接種菌用培養(yǎng)基、維生素測(cè)定用培養(yǎng)基。其中維生素測(cè)定用培養(yǎng)基重要，也為關(guān)鍵。

　　

　　鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別，因而有助開(kāi)快速鑒別某種微生物。這樣的培養(yǎng)基稱(chēng)之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基又稱(chēng)預(yù)制干燥培養(yǎng)基，指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。

　　

　　維生素測(cè)定培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用常見(jiàn)問(wèn)題：

　　

　　1.維生素測(cè)定培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎？

　　

　　答：維生素測(cè)定培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過(guò)肉眼觀察或通過(guò)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判定pH值，建議使用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定。

　　

　　2.維生素測(cè)定培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么？

　　

　　答：平衡鹽一般是由無(wú)機(jī)鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng)、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等。

　　

　　3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么？

　　

　　答：以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例：稱(chēng)取L-谷氨酰胺2.92g，加注射用水100ml，充分?jǐn)嚢杌靹颉Ｓ?.2μm濾膜正壓過(guò)濾除菌。溶液應(yīng)在4℃下避光保存，2周內(nèi)使用。

　　

　　以7.5%NaHCO3的配制為例：稱(chēng)取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過(guò)濾除菌。

　　

　　4.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？

　　

　　答：酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對(duì)生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生影響，可以通過(guò)純化技術(shù)去除，但酚紅在無(wú)血清培養(yǎng)基可能帶來(lái)胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長(zhǎng)，當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分，很多國(guó)外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。